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制備大腸桿菌菌懸液的步驟是什么?

發(fā)布時間:2019-06-13 07:50 編輯:創(chuàng)大鋼鐵 來源:
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先把菌液稀釋一定濃度后再用細胞計數(shù)板來確定菌濃度實驗原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的
先把菌液稀釋一定濃度后再用細胞計數(shù)板來確定菌濃度實驗原理:當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數(shù)目,即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數(shù)目。具體操作:1. 將計數(shù)板及蓋片擦拭干凈,并將蓋片蓋在計數(shù)板。2. 將細胞懸液吸出少許,滴加在蓋片邊緣,使懸液充滿蓋片和計數(shù)板之間,靜置3min,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。3. 計算板四大格細胞總數(shù),壓線細胞只計左側(cè)和上方的。然后按公式計算:細胞數(shù)/mL=四大格細胞總數(shù)/4×104說明:公式中除以4,因為計數(shù)了4個大格的細胞數(shù)。公式中乘以104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為:1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3(注意:鏡下偶見有兩個以上細胞組成的細胞團,應(yīng)按單個細胞計算,若細胞團10%以上,說明分散不好,需重新制備細胞懸液)
備注:數(shù)據(jù)僅供參考,不作為投資依據(jù)。
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